نیتروژن گازی است که همراه با ده ترکیب بی اثر دیگر در تولید به طور گسترده ای مورد استفاده قرار می گیرد. همیشه حمل و نگهداری این گاز به شکل خالص توصیه نمی شود و گاهی اوقات فقط باید وجود آن را در ماده تعیین کنید. برای این منظور از روش Kjeldahl استفاده می شود. روش Kjeldahl در این واقعیت است که نیتروژن ، که در مایع فیلتر شده بدون پروتئین وجود دارد ، در هنگام واکنش احتراق با اسید سولفوریک به آمونیوم تبدیل می شود. آمونیاک حاصل پس از واکنش قلیایی آزادانه آزاد می شود.
دستورالعمل ها
مرحله 1
برای تجزیه و تحلیل ، 4 میلی لیتر خون ، پلاسما یا سرم مصرف کنید ، آن را با 8 میلی لیتر آب مقطر رقیق کنید. 8 میلی لیتر اسید تری کلرواستیک به همان فلاسک اضافه کنید. محلول را خوب هم بزنید و فیلتر کنید.
گام 2
در فلاسک تقطیر ، 5 میلی لیتر از مایع فیلتر شده را بریزید ، که به طور پیش فرض حاوی 1 میلی لیتر از خون تجزیه شده است. 1 میلی لیتر معرف شماره 2 در آنجا اضافه کنید ، فلاسک را با شعله ملایم گرم کنید تا بخار سفید ظاهر شود.
مرحله 3
فلاسک را طوری قرار دهید که ته آن کمی شعله های آتش را لمس کند. فرآیند احتراق کامل در نظر گرفته می شود که مایع مایل به آبی یا بی رنگ شود.
مرحله 4
فلاسک را کنار بگذارید تا خنک شود. یک و نیم تا دو دقیقه کافی است. در غیر این صورت رسوب نامحلول تشکیل می شود.
مرحله 5
آب را به پایین دیوار بریزید ، قیف را با آن بشویید. لرزش تا زمانی که مخلوط شود ، در صورت لزوم فلاسک را گرم کنید.
مرحله 6
دستگاه را جمع کنید ، گیرنده را متصل کنید. 10 میلی لیتر 0.01 N. درون گیرنده قرار دهید. محلول اسید سولفوریک. یک یا دو قطره متیلروت اضافه کنید. پس از ترکیب همه مواد ، پمپ واتر جت را به گیرنده وصل کنید.
مرحله 7
هوا را از طریق آماده سازی عبور دهید ، 33٪ هیدروکسید سدیم را در قسمت تقطیر ریخته تا مایع از بی رنگ به آبی تیره یا قهوه ای تیره تبدیل شود. این نشان دهنده یک واکنش قلیایی است.
مرحله 8
تقطیر را پس از ده دقیقه متوقف کنید. شیر پمپ جت آب را ببندید ، شاخه گیرنده را باز کنید ، اسید سولفوریک را از انتهای لوله تبرید بشویید. با گیرنده دیگری با همان حجم 0.01N جایگزین کنید. محلول اسید سولفوریک ، یک تقطیر دوم انجام دهید.
مرحله 9
سود سوزآور را به اولین گیرنده اضافه کنید تا زمانی که برای مدت زمان 30 ثانیه رنگ زرد پایدار بدست آید.
مرحله 10
نتیجه گیری: 1 میلی لیتر 0.01 N. اسید سولفوریک یا هیدروکسید سدیم مربوط به 0.14 میلی گرم ازت است.
تفاوت بین مقدار اسید سولفوریک قرار داده شده در گیرنده و مقدار هیدروکسید سدیم گرفته شده در هنگام تیتراسیون ، تولید شده در 0.14 میلی گرم ، برابر با مقدار نیتروژن باقیمانده در آزمایش 1 میلی لیتر خون است. برای نشان دادن میزان نیتروژن در میلی گرم ، نتیجه باید در 100 ضرب شود.
